国家药监局根据《中华人民共和国药品管理法》及其实施条例的有关规定于5月18日发布丹七片中异性有机物检查项补充检验方法等4项补充检验方法的公告（2023年第66号），其中《小柴胡颗粒中黄芩提取物检查项补充检验方法》是我们所要阐述的主要内容，后附《小柴胡颗粒中黄芩提取物检查项补充检验方法》原文标准。

小柴胡颗粒，由柴胡、黄芩、姜半夏、党参、生姜、甘草、大枣七味中药材经过严格的生产工艺进行萃取，加入适当的辅料制成颗粒状冲剂。常用于解表散热，疏肝和胃。用于外感病，邪犯少阳证，症见寒热往来、胸胁苦满、食欲不振、心烦喜呕、口苦咽干。开水冲服。

本文采用太玮科技GOWON^®Polar-MS按小柴胡颗粒中黄芩提取物检查项补充检验方法和2020版《中国药典》一部对小柴胡颗粒中黄芩提取物进行检测，结果能满足检测要求。

检测项目/组分：黄芩苷（CAS：21967-41-9）、汉黄芩苷（CAS：51059-44-0）

【检查】黄芩提取物

溶液配制：

对照品溶液的制备 取黄芩苷对照品和汉黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml各含60µg的混合对照品溶液。

供试品溶液的制备 取本品，混匀，研细，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%乙醇溶液25ml，密塞，称定重量，超声处理（功率350W，频率37kHz）45分钟，取出，放冷，再称定重量，用50%乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，滤液用0.22μm微孔滤膜滤过，即得。

色谱条件：

色谱柱：GOWON^® Polar-MS 2.7µm100×4.6mm（PN：0737-1046）

保护柱：核壳通用保护柱（PN：G2030-K11）

流动相：甲醇为流动相A，0.5%甲酸为流动相B，以下表进行梯度洗脱

流速：0.6ml/min

检测器/波长：DAD /270nm

柱温：25 ℃

进样量：5μL

【特征图谱】

对照品图谱：

供试品图谱：

峰1（S）：黄芩苷  峰4：汉黄芩苷  峰5：黄芩素

标准规定：

供试品色谱中应呈现5个特征峰，并应与对照药材参照物色谱中的5个特征峰保留时间相对应，其中峰1与峰4应与对参照物峰的保留时间一致，且峰4与峰1的峰面积比值应不低于0.10。

理论板数按黄芩苷峰计算应不低于5000。

【含量测定】

对照品溶液的制备 取黄芩苷对照品适量，精密称定，加70%乙醇制成每1ml含60μg溶液，即得。

供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品，混匀，取适量，研细，取约3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率50kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

色谱条件：

色谱柱：GOWON^®  Polar-MS 2.7µm100×4.6mm（PN：0737-1046）

保护柱：核壳通用保护柱（PN：G2030-K11）

流动相：甲醇-水-磷酸（46：54：0.2）

流速：1.0ml/min

检测器/波长：DAD /315nm

柱温：25℃

进样量：5μL

供试品图谱：

标准要求：

理论板数按黄芩苷峰计算应不低于3000。

结论：用GOWON^® Polar-MS 2.7µm100×4.6mm在规定色谱条件下测定小柴胡颗粒，能满足检测要求。

说明：本法按《小柴胡颗粒中黄芩提取物检查项补充检验方法》/attached/file/20230616/20230616162645_99456.docx和2020版《中国药典》一部进行检测，没有改变，符合标准要求。