本品为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥根经炮制并按标准汤剂的主要质量指标加工制成的配方颗粒。具有解毒,消痈,截疟,润肠通便之功效,可用于治疗疮痈,瘰疬,风疹瘙痒,久疟体虚,肠燥便秘。其指标性成分为2,3,4,5,’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷,对其含量进行测定,能精准地为何首乌配方颗粒质量提供了依据。
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【特征图谱】
参照物溶液的制备取何首乌对照药材0.2g,置锥形瓶中,加70%甲醇25mL,超声处理(功率250W,频率40kHz)20分钟,取出,放冷,摇匀,滤过,取续滤液,作为对照药材参照物溶液。另取2,3,4,5,’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品溶液,作为对照品参照物溶液。
供试品溶液的制备 取本品适量,研细,取约0.2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%甲醇25mL,密塞,称定重量,超声处理(功率250W,频率40kHz)20分钟,放冷,再称定重量,用70%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,即得。
色谱条件
色谱柱:JADE-PAK® DIS-C18 1.7µm 100×2.1mm
保护柱:UPLC 通用型保护柱(PN:G2030-K11)
流动相:以乙腈为流动相A,以 0.1%磷酸溶液为流动相 B,梯度洗脱;
流速:0.4mL/min
检测器/波长:PDA/254nm
柱温:35℃
进样量:1μL
供试品溶液特征图谱结果:
【含量测定】
对照品溶液的制备取2,3,4,5,’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品适量,精密称定,加稀乙醇制成每1mL含0.2mg的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取本品适量,研细,取约0.2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%甲醇25mL,密塞,称定重量,超声处理(功率250W,频率40kHz)20分钟,放冷,再称定重量,用70%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,即得。
色谱条件
色谱柱:JADE-PAK® KP-C18 1.7µm 100×2.1mm
保护柱:UPLC 通用型保护柱(PN:G2030-K11)
流动相:以乙腈为流动相A,以 0.1%磷酸溶液为流动相 B,梯度洗脱;
流速:0.4mL/min
检测器/波长:PDA/320nm
柱温:35℃
进样量:1μL
对照品溶液谱图
供试品溶液谱图
【结果与分析】
使用JADE-PAK® DIS-C18 1.7µm 100×2.1mm色谱柱测试何首乌配方颗粒的特征图谱项,特征峰1、峰2、峰4、峰5、峰6、峰7与2,3,4,5,’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷参照物峰的相对保留时间分别为0.2、0.57、1.89、2.11、2.74、3.05,均在规定值的±10%范围内;使用JADE-PAK® KP-C18 1.7µm 100×2.1mm色谱柱测试何首乌配方颗粒的含量测定项,对照品溶液和供试品溶液的二苯乙烯苷目标峰塔板数分别为91191.3、90864.3,分离度均大于1.50,满足标准要求。