黄曲霉毒素由黄曲霉、寄生曲霉、集峰曲霉和伪溜曲霉等多种真菌产生，属于典型的生物源危害物。食品中常见的黄曲霉毒素有黄曲霉B₁、B₂、G₁、G₂和M₁。其中AFT B₁毒性最大，致癌性最强，广泛分布在农作物的生长、收获、储存、运输各个阶段，对粮油作物、饲料、中草药和坚果等产品及其加工制品造成了严重的污染。

图1 黄曲霉B族和G族衍生前后的荧光强度比对

  根据不同研究表明，如图1，AFT B₁在未进行光化学衍生前，荧光强度均低于40000，光化学衍生4min后，荧光强度均有增加，其中70%甲醇水中的AFT B₁荧光强度增幅最大。AFT G₁在100%乙腈中未进行光化学衍生的荧光强度最大，但引入水后（如80%乙腈水）发生了荧光淬灭，荧光强度大幅降低；经光化学衍生后在70%甲醇水中AFT G₁的荧光强度最大。AFT B₂和AFT G₂未进行光化学衍生和光化学衍生后的荧光强度相差不大，光化学衍生对其荧光强度无增强作用。

图2  AFT B₂和AFT G₂化学结构式

图3  AFT B₁和AFT G₁及其衍生物的化学结构式

本文参考食品安全国家标准《GB 5009.22-2016 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定 第三法 高效液相色谱法-柱后衍生法》，使用JADE PAK AF-C18 250mm×4.6mm 5μm（PN:0367-2546）色谱柱，U3000系统，黄曲霉毒素标准品在0.1ng/mL~10ng/mL范围内线性回归系数R2=0.999，AFT G₁和AFT B₂的分离度RS=1.81。

色谱条件

实验谱图

图4  四种黄曲霉毒素光化学衍生谱图（5ng/mL标准溶液）

图5 AFT G₂校正曲线

图6  AFT G₁校正曲线

图7  AFT B₂校正曲线

图8  AFT B₁校正曲线

 结论 

本方案使用JADE PAK AF-C18 250mm×4.6mm 5μm（PN:0367-2546）色谱柱，U3000系统，柱后光化学衍生，对AFT B₁、AFT G₁荧光增强效果显著，且AFT B₂和AFTG₂荧光强度稳定，黄曲霉毒素最低检测限为0.1ng/mL，标准品在0.1ng/mL~10ng/mL范围内线性回归系数R²=0.999，大大提高了检测灵敏度。